Аллергический метод исследования. Иммунно-аллергологическое обследование. Лабораторные исследования при аллергии

Аллергические заболевания – группа заболеваний, характеризующихся комплексом патофизиологических процессов, ключевым звеном которых является избыточная сенсибилизация иммунной системы к определенным этиологическим факторам (аллергенам). У больного с аллергическим заболеванием при первичном контакте с аллергеном происходит образование специфических антител или специфически реагирующих Т-лимфоцитов. При повторном контакте развивается реакция гиперчувствительности, тип которой определяется видом аллергена, локализацией проникновения аллергена в организме, а также рядом внутренних и внешних факторов.

Лабораторная диагностика аллергических заболеваний становится все более важной составляющей комплексного обследования, проводимого врачом-аллергологом. Важным преимуществом такой диагностики аллергических заболеваний является о, что она, в отличие от кожных аллергопроб, практически не имеет противопоказаний к проведению исследования. Взятие крови для анализа безопасно и может быть проведено у людей любого возраста и состояния, в т. ч. у грудных детей и беременных женщин. Лабораторные исследования можно выполнять и в период повышенной сенсибилизации или обострения заболевания, проводить на фоне лечения. В ряде случаев (элиминация конкретного аллергена, анти-IgE терапия) мониторинг лечения проводят при помощи соответствующих лабораторных исследований.

Увеличению роли лабораторной диагностики в аллергологии способствуют объективные причины, связанные со значительным ростом числа аллергических заболеваний и их распространенности. Существенно увеличилось и число аллергенов, которые способны привести к тяжелым клиническим последствиям, в т. ч. новых аллергенов искусственного происхождения. В таких условиях возникает потребность скринингового обследования большого числа людей с подозрением на аллергические заболевания.

Аллергены, вызывающие патологическую иммунную реакцию у пациента, называют причинно-значимыми или причинными аллергенами. Моноаллергенами называют выделенные из причинно-значимого аллергена отдельные вещества (белки, полисахариды, гликопротеиды, металлопротеиды), к эпитопам которых вырабатываются специфические антитела или рецепторы лимфоцитов. Моноаллергены играют большую роль в современной аллергологии, так как в одном причинно-значимом аллергене может содержаться целый комплекс потенциальных моноаллергенных компонентов, но только один или несколько из них будут реальными этиологическими агентами аллергических реакций у конкретного пациента. Для определения специфических антител в наборах реагентов нового поколения используются препараты подобных аллергенов, полученные по технологиям высокой очистки экстракта природного источника или созданные путем биотехнологических процессов. Разработанные новые технологии позволяют провести анализ для выявления сразу большого числа аллергенов одновременно, выполнить скрининговое обследование без подробного выяснения анамнеза. В арсенале многих производителей наборов реагентов для аллергодиагностики тысячи аллергенов, к которым можно определять специфические антитела.

В лабораторной диагностике аллергических заболеваний определяют преимущественно уровень общих IgE-антител и специфических IgE- и IgG4-антител в сыворотке крови к отдельным аллергенам или группам аллергенов природного или искусственного происхождения. IgE-зависимая реакция возникает в течение нескольких минут после контакта с аллергеном, а IgG (IgG4)-зависимая (наиболее часто встречаемая при пищевой аллергии) развивается в более поздние сроки – через часы, иногда даже через несколько суток после контакта с аллергеном.

Показания к исследованию

• Скрининг аллергических заболеваний;
• развернутое обследование в срочных клинических случаях;
• выбор адекватной терапии и контроль тактики ведения пациента;

Методы исследования: Для определения антител (общий IgE, специфические IgE, IgG, IgG4) используют различные иммунохимические методы исследования.

Общий IgE

В норме концентрация суммарных (общих) IgE-антител очень мала и не превышает 0,05% по сравнению с концентрацией IgG-антител. Общее количество IgE-антител начинает возрастать у ребенка после рождения и продолжает расти до 10–14 лет, после чего у здоровых людей стабилизируется на постоянном уровне и снижается после 60 лет. Повышение уровня концентрации общего IgE в крови наблюдается преимущественно при аллергических заболеваниях, развивающихся по механизму реакций гиперчувствительности I типа (атопические заболевания). В большинстве случаев повышение концентрации общих IgE выше 100 U/л у взрослых людей и более 20 U/л у детей до 4 лет может свидетельствовать об аллергическом заболевании.

Определение специфических IgE выполняют при наличии IgE-зависимой пищевой аллергии, а также при невозможности проведения кожных проб, в т. ч. у детей и лиц пожилого возраста, у пациентов с заболеваниями кожи, аллергическими реакциями в анамнезе и др. Интерпретация результатов исследования требует осторожности, заключение должно быть сделано врачом-аллергологом с учетом анамнеза и клинической картины заболевания.

Специфические IgG

В последние годы внимание аллергологов привлекает IgE-независимая пищевая аллергия, иммунопатогенез которой связан с выработкой различных подклассов IgG антител, участвующих в иммунопатологических реакциях с хроническими воспалительными заболеваниями и “скрытыми” формами пищевой аллергии. Для диагностики скрытой пищевой аллергии используют количественное определение подклассов IgG специфических антител (IgG1-IgG4) к индивидуальным антигенам пищевых продуктов. Как и при интерпретации результатов выявления общего и специфических IgE, заключение должно быть сделано врачом-аллергологом с учетом анамнеза и клинической картины заболевания.

АЛЛЕРГОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Аллергия — это патологическая форма иммуногенной реактивности организма, при которой наблюдается повышение чувствительности организма к повторному воздействию аллергенов.

Аллергенами называют вещества, которые при первом поступлении в организм вызывают образование антител класса IgE, а при последующем введении — дегрануляцию тучных клеток, сенсибилизированных IgE-антителами. Фактически аллергены — это разновидность антигенов. Обычно аллергены являются полипептидами или белками с молекулярной массой 5-15 кДа и могут иметь самую разнообразную структуру: известно более 120 семейств белков, к которым могут принадлежать аллергены. Проявлению аллергенности способствует: наличие протеазной активности (например, у клещевых аллергенов домашней пыли), способность взаимодействовать с липидами (например, у пищевых антигенов растительного и животного происхождения) и различными другими лигандами, способность проникать через тканевые барьеры и обеспечивать перекрестное сшивание молекул IgE, связанных с рецепторами тучных клеток, введение в низких дозах, поступление в организм через слизистые оболочки и т. д.

Сенсибилизация к аллергену может проходить как через желудочно-кишечный, так и через респираторный тракт при вдыхании аллергена. При этом ингаляционные аллергены (главным образом, пыльцевые) вызывают образование IgE, которые перекрестно реагируют с похожими протеинами в пищевых продуктах. Это является причиной развития перекрестных аллергических реакций, при этом клиническая симптоматика определяется стабильностью перекрестно-реагирующих пищевых аллергенов. Перекрестная реакция — аллергическая реакция, которая возникает в результате повышенной чувствительности к аллергенам, схожим по своему строению. В основе перекрестной реактивности лежит сходство эпитопов: различные аллергены могут содержать общие эпитопы, которые так же сходны, как молекулы со сходной аминокислотной последовательностью.

Наследственная предрасположенность к аллергии отражена в термине «атопия» — генетически опосредованной предрасположенности к реакциям аллергического типа. Атопические проявления — индивидуальная или семейная склонность организма вырабатывать IgE-антитела в ответ на небольшое количество аллергенов, что чаще всего проявляется типичными симптомами астмы, риноконъюнктивита или экземы/дерматита. Аллергический фенотип проявляется по-разному в различные периоды жизни. Так, пищевая аллергия играет доминирующую роль в первые годы жизни. Клинические проявления, в основном, представлены атопическим дерматитом и желудочно-кишечными симптомами. По мере увеличения частоты случаев пищевой аллергии с возрастом, значительно увеличивается значение вдыхаемых аллергенов с установлением симптоматики со стороны верхних и нижних дыхательных путей. Термин «атопия» описывает данную клиническую предрасположенность и не должен использоваться для описания болезней. Одно из ее проявлений — отсутствие строгой связи склонности к аллергическому типу ответа с конкретным видом аллергена. В связи с этим развивается типичное проявление прогрессирования аллергических процессов — расширение спектра аллергенов, вызывающих патологические реакции.

Аллергические процессы состоят из двух фаз: сенсибилизации и проявления аллергических реакций. Обе фазы запускаются поступлением в организм аллергенов. При развитии сенсибилизации какие-либо проявления аллергии отсутствуют.

Различают 4 типа аллергических реакций:

1-й тип — реакция гиперчувствительности немедленного типа (анафилактический, атопический тип). Обусловлена освобождением активных субстанций из тучных клеток, сенсибилизированных IgE-антителами, при связывании ими аллергена. Развивается с образованием антител, относящихся к классу IgE и IgG4. Они фиксируются на тучных клетках и базофилах. При соединении реагинов с аллергеном из этих клеток выделяются медиаторы: гистамин, гепарин, серотонин, тромбоцитактивирующий фактор, простагландины, лейкотриены и другие, определяющие клинику аллергической реакции немедленного типа. После контакта со специфическим аллергеном клинические проявления реакции возникают через 15-20 мин. К клиническим формам проявления реакций 1-го типа относят: анафилактический шок, крапивницу, отек Квинке, бронхиальную астму, аллергический ринит, конъюнктивит, пищевую, инсектную, латексную аллергию, атопический дерматит (неинфекционные аллергены, пищевые, лекарственные вещества).

2-й тип — гиперчувствительность , обусловленная цитотоксическим эффектом антител, вовлекающих комплемент или эффекторные клетки. Тип характеризуется тем, что антитела образуются к клеткам тканей и представлены IgG и IgM. Этот тип реакции вызывается только антителами, способными активизировать комплемент. Антитела соединяются с видоизмененными клетками организма, что приводит к реакции активации комплемента, который также вызывает повреждение и разрушение клеток, с последующим фагоцитозом и удалением их. Возникновение реакций по цитотоксическому типу обуславливает развитие гемопатий (гемолитическая анемия, лейкопения, тромбоцитопения, агранулоцитоз, панцитопения), вызванных лекарственными, химическими, органическими веществами.

3-й тип — иммунокомплексная реакция (повреждение тканей иммунными комплексами — тип Артюса, иммунокомплексный тип) . Возникает в результате образования циркулирующих иммунных комплексов, в состав которых входят IgG и IgM. Антитела этого класса называют преципитирующими, так как они образуют преципитат при соединении с антигеном. Этот тип реакции является ведущим в развитии сывороточной болезни, аллергических альвеолитов, экземы, лекарственной и пищевой аллергии, при ряде аутоаллергических заболеваний (СКВ, ревматоидный артрит и др.). Обусловлена провоспалительным действием растворимых иммунных комплексов.

4-й тип — реакция гиперчувствительности замедленного типа (аллергическая реакция замедленного типа, клеточная гиперчувствительность) . Связана с активностью провоспалительных Т-лимфоцитов и активируемых ими макрофагов, а также цитокинов, секретируемых названными клетками. При этом типе реакций роль антитела выполняют сенсибилизированные Т-лимфоциты, имеющие на своих мембранах рецепторы, способные специфически взаимодействовать с сенсибилизирующими антигенами. При соединении лимфоцита с аллергеном выделяются медиаторы клеточного иммунитета — лимфокины. Они вызывают скопление макрофагов и других лимфоцитов, в результате чего возникает воспаление. Одной из функций медиаторов является вовлечение их в процесс разрушения антигенов (микроорганизмов или чужеродных клеток), к которым сенсибилизированы лимфоциты. Реакции замедленного типа развиваются в сенсибилизированном организме через 24-48 часов после контакта с аллергеном. Клеточный тип реакции лежит в основе развития вирусных и бактериальных инфекций (туберкулез, сифилис, лепра, бруцеллез, туляремия), некоторых форм инфекционно-аллергической бронхиальной астмы, ринита, трансплантационного и противоопухолевого иммунитета, а также контактного, фотоаллергического, эритемо-везикулярного дерматитов, геморрагических васкулитов, латексной аллергии.

Классификация аллергенов:
1. Эндоаллергены — это аллергены, образующиеся внутри организма (клетки, поврежденные инфекцией, химическими, физическими воздействиями).
2. Экзоаллергены — это вещества, воздействующие на организм извне:

• инфекционные аллергены: бактериальные, вирусные, аллергены грибов, аллергены гельминтов;
• неинфекционные аллергены: пыльцевые, пищевые, бытовые, эпидермальные, инсектные, лекарственные, промышленные аллергены.

Пути проникновения экзоаллергенов в организм: перкутанный, ингаляционный, энтеральный, парентеральный.

Ингаляционные аллергены

Пыльца является аллергеном, отвечающим, в зависимости от страны и местности, за возникновение относительно большого числа интермиттирующих ринитов, риноконъюнктивитов и бронхиальной астмы. Растения, содержащие аллергенную пыльцу, делятся на: злаковые, травы, деревья. Злаковые включают около 9000 видов. Существуют огромные различия относительно их опыления в мире. В Европе этот период охватывает месяцы май—июль. Cynodon dactylon, Lolium perenae, Sorghum halepense, Bromus inermis, Holcus lanata, Phleum pratense, Triticum sativum, Festuca elation являются наиболее важными аллергенными пыльцевыми растениями в нашей стране и в зоне умеренного климата Европы. Пыльца трав стоит на втором месте в отношении сенсибилизации пыльцой в нашей стране. Самые тяжелые случаи сенсибилизации, как правило, вызваны пыльцой амброзии (Ambrosia artemisitolia, psilostachya, trifida). Определенное значение имеет пыльца Artemisia absinthium, Artemisia vulgaris (полынь черная) и Crysantemum, которые появляются в нашей стране особенно в середине и в конце лета. Деревья, с точки зрения аллергологии, объединены в семейство Fagale своими подразделами (например, Betulaceae, Fagaceae, Ulmaceae, Platunaceae, Oleaceae и т. д.). Хотя пыльца деревьев менее аллергенна, в некоторых районах сенсибилизация может быть значительной.

Споры аллергенных грибков , находящиеся в атмосфере, распространяются по всему земному шару, но распространенность видов различается, в зависимости от континента или региона, и особенно от времени года, в который было проведено исследование, зная, что частота случаев сводится в зимние месяцы практически к нулю. В нашей стране наиболее распространен грибок Cladosporium, который, являясь слабоаллергенным, как и Penicillium spp. и Alternaria spp., редко приводит к респираторной сенсибилизации, в то время как Aspergillus spp. считается одним из наиболее значимых в возникновении респираторных аллергических реакций агентом.

Домашняя пыль считается во многих странах основным респираторным сенсибилизирующим аллергеном, как при персистирующем рините, так и при бронхиальной астме. Он также участвует в качестве этиопатологического агента при некоторых аллергических дерматитах. Сама по себе пыль не является аллергеном. Она представляет собой некую смесь из потенциально аллергенных компонентов. Ее состав специфичен не только для определенной местности, но даже для каждого дома. Клещи, шерсть и эпидермис животных, остатки насекомых и грибов, а также остатки различных растений определяют в вышеуказанном порядке многообразие аллергенного состава домашней пыли. Основной аллерген домашней пыли — клещ Dermatophagoides pteronyssinus. Позднее был обнаружен и клещ Dermatophagoides farinae. Клещи встречаются в роговом слое кожи человека. Один грамм домашней пыли может содержать сотни и даже тысячи этих аллергенов, особенно в феврале—марте и сентябре—ноябре. Сенсибилизация к аллергенам домашних тараканов в составе домашней пыли или как к отдельному аллергену наблюдается довольно часто в последние годы. У сенсибилизированных лиц аллергизация может привести к бронхиальной астме или персистирующему риниту с участием аэроаллергенов, хотя возможны также случаи развития пищевой аллергии. Тараканы относятся к семейству Blatidаe и распространены повсеместно. Среди них наиболее известны Blatella germanica, Blatta orientalis, Periplaneta Americana, как и Blatta Africana. Кроме аллергических компонентов домашней пыли, которые образуются от шерсти и эпидермиса животных, они иногда могут быть самостоятельными аллергенами, и причем очень сильными. Кошачья шерсть является не только сильным, но и встречающимся повсеместно аллергеном. «Кошачий» аллерген представляет собой гликопротеин, который содержится, главным образом, в слюне, но обнаруживается также в значительном количестве и на шерсти животного. Сенсибилизация организма человека проявляется в виде персистирующего ринита и бронхиальной астмы, иногда достигающей тяжелой формы.

Шерсть животных. Собачья шерсть значительно реже приводит к сенсибилизации организма. Аллергены содержатся преимущественно в роговом слое эпидермиса, но могут быть найдены и в моче, сыворотке или слюне животного. Аллергические реакции к аллергенам морских свинок были описаны у людей, которые содержат морских свинок в качестве домашних животных. Источником аллергенов выступают шерсть, моча, слюна и эпителий животного. У сенсибилизированных лиц, чаще всего, отмечается развитие астмы, риноконъюнктивита, атопического дерматита. Подобные клинические симптомы могут развиваться и в ответ на аллергены эпителия хомяков.

Пищевые продукты содержат протеины, углеводы и липиды. Главные пищевые антигены — это водорастворимые гликопротеины, имеющие молекулярную массу в пределах 10-60 kDа. Эти белки устойчивы к кислотному воздействию, протеолизису и перевариванию. Процесс термической обработки пищи может изменить пространственную структуру белка, тем самым снизить аллергенность пищевого продукта. Однако многие продукты имеют термостабильные белки, которые не разрушаются при термической обработке. Считается, что аллергены молока, яиц, рыбы, орехов являются термостабильными, аллергены сои, сельдерея, злаков — частично термостабильными, аллергены овощей и фруктов — термолабильными. Овощи, фрукты, орехи выступают самыми важными аллергенами при пищевой аллергии. Причем эти пищевые продукты содержат протеины, имеющие гомологичные молекулярные детерминанты с аэрогенными аллергенами. Считается, что примерно с 4-6 лет жизни сенсибилизация на фрукты и овощи первично происходит не энтерально. Как правило, больные пищевой аллергией предварительно имеют респираторную сенсибилизацию (с различной степенью выраженности клинических симптомов). Эта сенсибилизация к респираторным аллергенам, возможно, и нарушает толерантность к пищевым продуктам.

Наиболее частыми аллергенами для детей являются: коровье молоко, яйца, орехи, соя, пшеница, рыба; а для взрослых — овощи и фрукты, орехи, рыба, продукты моря, специи.

Коровье молоко содержит более чем 25 различных протеинов, которые могут действовать как полноценные антигены для человека, но только 4-5 из них обладают сильными антигенными свойствами. Для развития пищевой аллергии особое значение имеют: бета-лактоглобулин (чувствительность к которому определяется у 60-70% пациентов, чувствительных к белкам коровьего молока), казеин (60%), альфа-лактальбумин (50%), бычий сывороточный альбумин (43-50%) и лактоферрин (35%). Белки коровьего молока отличаются друг от друга термоустойчивостью. Молоко содержит большое количество термостабильных аллергенов, в связи с чем термическая обработка молока не дает возможности включения его в диету пациентов с сенсибилизацией к белкам коровьего молока. Аллергические реакции на коровье молоко могут развиваться к одному или нескольким белкам по разным иммунологическим механизмам. В настоящее время доказаны I, II, IV типы аллергических реакций на белки коровьего молока.

Аллергия на мясо встречается относительно редко, так как аллергенный потенциал белков часто теряется при термической обработке продукта. Причиной аллергических реакций на мясо часто являются перекрестные реакции.

Куриное яйцо содержит не менее 20 различных белков, но только 4 или 5 из них являются аллергенами. Белок куриного яйца более аллергенен, чем яичный желток. Учитывая то, что желток, как правило, содержит компоненты белка куриного яйца, аллергические реакции могут быть связаны не с желтком, а с овомукоидом, овальбумином, овомуцином и овотрансферином, содержащимся в белке куриного яйца.

К злакам , употребляемым человеком в пищу, относятся пшеница, рожь, ячмень, овес. Мука злаков состоит из глютена, альбуминов, глобулинов и крахмала. Для зерновых культур главными антигенами являются альбумины и глобулины. Полагают, что астму вызывают альбумины, а пищевую аллергию — глобулины. Проходя через желудок, белки злаковых культур подвергаются действию пепсина и трипсина в двенадцатиперстной кишке. Из «переваренного» глютена получено три фракции, А, В и С. Токсическими для слизистой оболочки тонкой кишки являются В и С фракции. Перекрестные реакции между зерновыми и пыльцой трав встречаются довольно часто. Кроме того, именно с аллергическими реакциями на злаки может быть связана непереносимость алкогольных напитков, приготовленных с использованием злаковых культур.

Глютен , эластичный белок пшеницы, ржи и ячменя, часто используется при производстве печенья, пирожных и макаронных изделий, наибольшее значение имеет в патогенезе целиакии (наследственного заболевания иммунной системы, при котором потребление глютена вызывает поражение слизистой оболочки тонкого кишечника, приводящее к нарушению всасывания питательных веществ). Целиакия (непереносимость глютена), опосредованная иммуноглобулинами IgA и IgG, должна быть отдифференцирована от аллергии к белкам зерновых (в том числе и глютену), опосредованной иммуноглобулинами IgE и развивающейся по типу реакции немедленного типа (характеризуется проявлениями со стороны кожи, пищеварительной и дыхательной системы).

Орехи . Аллергия к орехам — это, главным образом, пожизненная сенсибилизация, сопряженная с тяжелыми, угрожающими жизни реакциями, возникающими даже при их случайном употреблении в пищу в мизерных количествах.

Рыба является одним из главных аллергенов, способных вызывать аллергические реакции по немедленному типу. Рыба может быть причиной респираторной, пищевой, контактной аллергии и даже анафилактических реакций. Аллергические реакции на рыбу могут развиваться при наличии в пище даже ничтожных количеств антигена, чувствительность к рыбе остается пожизненно.

Овощи и фрукты . Самыми частыми причинами развития пищевой аллергии являются овощи и фрукты. Увеличение частоты пищевой аллергии к данным продуктам связано с развитием перекрестных аллергических реакций. До 85% больных пыльцевой аллергией имеют перекрестную пищевую аллергию на овощи и фрукты. Аллергены фруктов и овощей в большинстве случаев термолабильные, так как многие из них теряют свои аллергенные свойства при термической обработке. Однако в растительной пище присутствуют и темостабильные аллергены. Например, они имеются в моркови, томатах, сельдерее. При варке такие аллергены переходят в отвар, поэтому употребление овощного отвара не может быть безопасным для пациента. Пищевые антигены содержат эпитопы, присутствующие в структуре профилина, и общие с эпитопами некоторых видов пыльцы (деревьев, трав, злаковых), поэтому аллергические реакции на фрукты и овощи, хотя и могут появляться всякий раз, когда потребляются данные пищевые продукты, но протекают значительно тяжелее в сезон цветения соответствующих растений.

Аллергизация от укусов насекомых не является распространенным явлением, но может иметь весьма тяжелые последствия, вплоть до смертельного исхода. Основными насекомыми этой категории являются пчелы (Apis mellifera) и осы (Vespula spp.). Все белки, содержащиеся в яде, вызывают аллергию, особенно гиалуронидаза и фосфолипаза А. После инокуляции яда наблюдается сравнительно быстрое развитие местных реакций с эритемой, сильным отеком и, в некоторых случаях, с анафилактическим шоком. Иногда наблюдаются клинические синдромы, такие как ринит и бронхиальная астма.

Обычно побочные реакции на лекарства делятся на аллергические и неаллергические реакции. Первые происходят по причине запуска иммунологических механизмов, из которых наиболее распространенным является реакция I типа, зависимые IgE, а также возможны механизмы II, III и IV типа. При I типе гиперчувствительности IgE-зависимого механизма основными аллергенами являются: пенициллин и его производные, нитрофурантоин, чужеродные сыворотки (в том числе гаммаглобулины), гормоны (АКТГ, ТТГ, инсулин) и вакцины (противостолбнячная, противогриппозная и другие, содержащие яичные компоненты). Бета-лактамные антибиотики (пенициллины и цефалоспорины) являются наиболее частой причиной аллергических реакций на лекарства. Сенсибилизация может возникать в ходе терапевтических процедур (парентеральное введение лекарственного средства характеризуется более высоким риском, в сравнении с пероральным), а также в результате потребления пищевых продуктов, полученных от животных, получавших пенициллин, или вследствие профессионального контакта с некоторыми химическими соединениями. Картина аллергических проявлений, IgE-зависимых, включает крапивницу, отек Квинке и анафилактический шок. Наличие бета-лактамных групп в молекуле пенициллинов и цефалоспорина способствует возникновению перекрестных реакций сенсибилизации между этими антибиотиками. Частота случаев их возникновения, однако, невысока, особенно для цефалоспоринов второго и третьего поколения. Пенициллин и его полусинтетические производные ведут себя как гаптены, которые становятся аллергенами только в случае их комбинации с белками плазмы или тканевыми белками, с образованием белково-пенициллинового комплекса или белково-пенициллинового метаболита, который стимулирует иммунный ответ. Считается, что существуют два типа аллергенных детерминант в составе пенициллина, а именно: основные аллергенные детерминанты (80-85% от общего числа метаболитов) — бензилпенициллины; второстепенные аллергенные детерминанты, состоящие из кристаллического пенициллина, бензилпенициллинов и альфа-бензил пенициламина. Аллергические реакции немедленного типа осуществляются посредством IgE-антител, образующихся к основным, к второстепенным детерминантам, и к обоим детерминантам одновременно. Следует отметить, что аллергические тесты in vitro выявляют только IgE-антитела к основным детерминантам.

Промышленные аллергены

Изоцианаты (диизоцианат толуол TDI, дифенилметилен МDI и гексаметилен HDI), которые широко используются в производстве пластмасс, клеев и красок, полиуретанов, адгезивов, эластомеров, изоляции электрических кабелей, и являются раздражающими веществами для глаз и дыхательных путей. Были описаны многие заболевания органов дыхания, в основе которых лежат реакции гиперчувствительности немедленного или замедленного типа: ринит, острый бронхит, астма, хронический бронхит, бронхопневмония и пневмония с гиперчувствительностью. Бессимптомное течение заболевания характеризуется очень низкими или не поддающимися обнаружению уровнями специфических антител IgE. Определение специфических IgE-антител позволяет, таким образом, проводить мониторинг профессионального контакта с изоцианатами, при этом повышение уровня напрямую связано с последствиями воздействий вредных факторов. Чувствительность определения специфических антител IgE наиболее высока при отборе проб крови в течение одного месяца с момента последнего воздействия вредного фактора.

Фталевый ангидрид — соединение, широко используемое в промышленности в качестве сырья для производства пластмасс, красок, полиэфирных смол. Среди IgE-зависимых реакций выделяют астму с предшествующим ей ринитом. Определение специфических IgE-антител с успехом используется при мониторинге контакта с профессиональными поллютантами.

Формальдегид используется в текстильной индустрии, производстве бумаги, резины, клеев, косметики. У лиц, контактирующих с этими материалами, могут вырабатываться специфические IgE, отвечающие за симптомы бронхиальной астмы.

Хлорамин Т — это микромолекулярное соединение, которое используется при стерилизации как антисептическое дезинфицирующее средство и химический реагент в больницах, лабораториях, в пищевой промышленности. Хлорамин участвует в возникновении профессиональной астмы у людей, подвергшихся воздействию вредных факторов. Также были установлены и другие IgE-опосредованные реакции — ринит и крапивница.

Окись этилена (этиленоксид) обычно используется для стерилизации медицинских термочувствительных инструментов. Стерилизованные продукты могут содержать остатки окиси этилена, вызывая у пациентов с хроническим гемодиализом аллергические реакции и анафилаксию, опосредованные специфическими антителами IgE, которые определяются в сыворотке крови.

Фермент альфа-амилаза , участвующая в расщеплении крахмала, является пищевой добавкой, широко используемой в пекарнях, имеет грибковое происхождение (Aspergillus niger или Orizae). Этот фермент вместе с зерновыми компонентами отвечает за сенсибилизацию и опосредованные IgE-реакции, которые регистрируются у мельников, пекарей и представителей других профессий, предполагающих контакт с мукой. Астма пекарей обусловлена циркуляцией в их крови IgE-антител, специфичных к альфа-амилазе. Sitophilus granarius является насекомым, загрязняющим зерно при хранении, будучи признанным в качестве одной из причин «астмы мельника» и «легкого фермера». У некоторых лиц, подвергающихся воздействию вредного фактора, могут наблюдаться специфические антитела IgE.

Латекс — это натуральный каучук, который получают из дерева Hevea brasiliensis. Он используется в производстве следующих видов продукции: хирургические перчатки, катетеры, презервативы, воздушные шары, спортивное снаряжение. Сенсибилизация может осуществляться как через дыхательные пути путем ингаляции порошка с латексных перчаток, так и через кожу за счет контакта с соответствующими продуктами. Проявления аллергии на латекс: отек Квинке, крапивница, экзема, ринит, астма, латекс-фруктовый синдром, а иногда и анафилаксия. В группу высокого риска, в отношении аллергии на латекс, включены, кроме медицинского персонала, работники резиновой промышленности, дети spina bifida или урологической патологией, пациенты, перенесшие несколько хирургических операций, подвергшиеся длительному воздействию латекса. Табак — это растение семейства пасленовых. Аллергия на табачный лист, опосредованная антителами IgE, была описана у фермеров и работников табачной промышленности; клинические проявления включают крапивницу и риноконъюнктивит. Было также зарегистрировано наличие общих антигенных эпитопов между табаком и пыльцой полыни.

Лабораторная диагностика аллергических заболеваний

Основными задачами лабораторной диагностики аллергических заболеваний являются: определение типа аллергической реакции, установление сенсибилизации к аллергенам (специфическая аллергодиагностика), выявление характера и степени иммунных нарушений (иммунодиагностика), характеристика патогенетических изменений, типичных для данного аллергического заболевания (клиническая лабораторная диагностика).

Иммунологические лабораторные тесты можно разделить на две большие группы:

• неспецифические (направленные на выявление общих изменений иммунной системы при аллергических заболеваниях);
• специфические (выявление участвующих в иммунологической фазе аллергической реакции антител и клеток).

Использование специфических методов лабораторной диагностики аллергических заболеваний позволяет:

• подтвердить наличие сенсибилизации;
• выявить скрытую (субклиническую) сенсибилизацию;
• провести дифференциальную диагностику положительных/ложноположительных или отрицательных/ложноотрицательных результатов кожных проб;
• определить возможные этиологические факторы аллергии при наличии противопоказаний к проведению кожных проб с аллергенами.

Следует учитывать, что специфическая аллергодиагностика характеризует только иммунные нарушения, а не реакцию всего организма, поэтому полученные результаты не могут служить единственным доказательством того, что именно данный аллерген является этиологической причиной аллергического заболевания. Предположение о ведущих патогенетических механизмах обусловливает выбор адекватных методов лабораторной диагностики аллергических заболеваний.

Методы специфической лабораторной диагностики

Иммунохемилюминесцентный (ИХЛА) анализ — это лабораторные исследования, в основе которых лежат иммунные реакции антигена с антителом. Метод обладает высокой чувствительностью и специфичностью, которая составляет 90%.

Иммунохроматографический анализ (ИХА) — иммунохимический метод анализа, основанный на принципе тонкослойной хроматографии и включающий реакцию между антигеном и соответствующим ему антителом в биологических материалах. Проводится с помощью специальных тест-полосок, панелей или тест-кассет.

Метод иммуноблотинга разработан на основе ИФА и применяется для выявления спектра антител к антигенным смесям. Технология ImmunoCAP определения аллерген-специфических IgE: в основе метода лежит полностью автоматизированное иммуноферментное определение аллергенспецифических IgE с регистрацией результатов хемилюминесцентным способом. Данная технология позволяет обнаружить сверхнизкие концентрации IgE и других показателей в сверхмалом количестве крови пациента. Это обеспечивает высокую точность исследований, их воспроизводимость и быстроту выполнения.

Определение специфических антител IgE
Количественная оценка циркулирующих IgE-антител к специфическим аллергенам позволяет :

• проводить объективную оценку сенсибилизации к определенному аллергену;
• идентифицировать аллергены, вероятно отвечающие за аллергическое воспаление и симптомы, возникающие у пациента;
• прогнозировать развитие аллергических реакций в будущем (наличие на первом году жизни специфических IgE антител к пищевым аллергенам ассоциировано с повышенным риском сенсибилизации к ингаляционным аллергенам и развитием аллергического заболевания в более старшем возрасте (7-10 лет));
• проводить мониторинг иммунотерапии.

Основные преимущества проведения аллерготестов in vitro :
а) безопасность для пациента (не требуют введения в организм больного дополнительного количества аллергена);
б ) могут проводиться во всех возрастных группах;
в) возможность использования в любой период заболевания;
г) медикаментозное противоаллергическое лечение не влияет на результат, и нет необходимости в его прерывании;
д) возможность проведения неограниченного количества аллерготестов за один раз;
е) результаты аллерготестов выдаются в количественном или полуколичественном виде, который характеризует степень сенсибилизации организма данным аллергеном.

Особенности при интерпретации и диагностические ограничения специфического IgE:
а) обнаружение аллергенспецифического IgE к какому-либо аллергену или антигену не доказывает, что именно этот аллерген ответственен за клиническую симптоматику; окончательное заключение и интерпретация лабораторных данных должны быть сделаны только после сопоставления с клинической картиной и данными развёрнутого аллергологического анамнеза;
б) титр специфических IgE не всегда коррелирует с тяжестью симптомов аллергического заболевания;
в) оценка значимости повышения концентрации сывороточного IgE зависит от метода исследования, вида аллергена, возраста пациента и характера заболевания;
г) отсутствие специфического IgE в сыворотке периферической крови не исключает возможности участия IgE-зависимого механизма, так как местный синтез IgE и сенсибилизация тучных клеток может происходить и в отсутствие специфического IgE в кровотоке (например, аллергический ринит);
д) антитела других классов, специфичные для данного аллергена, особенно класса IgG (IgG4), могут быть причиной ложноотрицательных результатов;
е) исключительно высокие концентрации общего IgE, например, у отдельных больных атопическим дерматитом, могут за счёт неспецифического связывания с аллергеном давать ложноположительные результаты;
ж) идентичные результаты для разных аллергенов не означают их одинакового клинического значения, так как способность к связыванию с IgE у разных аллергенов может быть различной.

Исследование нецелесообразно:

• при атопических заболеваниях в случаях удовлетворительных результатов специфической терапии по данным кожных проб;
• у больных с не-IgE-зависимым механизмом аллергических реакции.

Маркер перекрестной реакции (CCD — cross-reactive carbohydrate determinants). Многие аллергены являются гликопротеидами и могут содержать определенные антигенные структурные элементы, в частности карбогидратные структуры, к которым у некоторых пациентов могут вырабатываться антитела. ССD-компонент (CCD — cross-reactive carbohydrate determinants) присутствует в составе многих аллергенов растительного или животного происхождения. Маркер перекрестной реакции определяет результат реакции с белковыми структурами антигена (выявление специфических IgE к CCD), таким образом обеспечивает дополнительную информацию и помогает в интерпретации результатов тестов, когда они расходятся с клиническими симптомами, результатами кожных тестов или если значительная часть тестов на наличие специфических IgE положительна.

Рекомбинантные антигены — искусственно синтезированные белковые антигены — аналоги отдельных компонентов (белков) природных антигенов, полученные методом генной инженерии, первоначально выделенные из аллергенного экстракта. Каждый аллерген представляет собой набор антигенов — белковых компонентов, вызывающих индукцию IgЕ-антител и аллергические симптомы. Рекомбинантная технология позволяет получать аллергены, идентичные тем, которые встречаются в природе, при этом они не подвергаются каким-либо воздействиям при их извлечении, как это бывает при использовании обычных методов экстрагирования. Выделяют основные и минорные аллерген-компоненты . Основные аллерген-компоненты встречаются в определенной группе аллергенов, чем обусловлена перекрестная аллергия. Минорные — характерны для определенного аллергена. Особенности интерпретации: тесты по выявлению IgE к рекомбинантным антигенам позволяют предоставить врачу дополнительную информацию по уточнению причин аллергической реакции для определения тактики ведения пациента и назначения аллерген-специфической иммунотерапии. Если аллергические реакции у пациента обусловлены сенсибилизацией к основному компоненту аллергена, то с высокой степенью вероятности можно прогнозировать высокий терапевтический эффект от АСИТ, если пациент чувствителен к минорному компоненту, то иммунотерапия будет недостаточно эффективной, и даже возможно развитие новой сенсибилизации. При наличии IgE к рекомбинантным антигенам и отсутствии их при определении специфического IgE к одному и тому же аллергену, можно предположить наличие перекрестной реакции, в случае обоих положительных результатов тест позволяет подтвердить природу аллергической реакции к данному антигену и определить конкретный белковый компонент, вызывающий аллергическую реакцию, при получении отрицательного результата по IgE к рекомбинантным антигенам и положительном к специфическому IgE — можно предположить, что аллерген-специфическая терапия будет неэффективна, так как возможно наличие неспецифической реакции.

Специфические антитела класса IgG:

• часто встречаются при пищевой аллергии, однако выявляемые IgG не обязательно реактивны к тем же белковым компонентам, что и IgE-антитела;
• IgG-антитела к аллергену могут выполнять и функцию блокирующих антител, которые уменьшают выраженность аллергических реакций, протекающих с участием специфических IgE;
• IgG антитела к пищевым аллергенам можно обнаружить у здоровых людей как свидетельство повышенного потребления тех или иных продуктов без наличия к ним аллергии.

Исследование IgG к пищевым аллергенам обычно проводят в дополнение к исследованию IgE, что позволяет сформировать перечень аллергенов, которые необходимо учитывать при формировании дальнейшей тактики ведения пациента.

Специфические IgG4-антитела могут участвовать при сверхчувствительных реакциях II (цитотоксического) и III (иммунокомплексного) типов, а также могут выступать в роли блокирующих или реагиновых антител. Уровень IgG4 может являться одним из критериев эффективности аллергоспецифической иммунотерапии. При проведении мониторинга лечения при установленной аллергии необходимо определить исходный уровень IgG4 к данному аллергену. Увеличение содержания коррелирует с уменьшением чувствительности к данному аллергену. Интерпретацию результатов теста необходимо проводить в комплексе с клинико-анамнестическими данными и результатами дополнительных методов исследования.

АЛЛЕРГОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Удельный вес аллергических заболеваний в патологии человека неуклонно возрастает. Важную роль в их диагностике отводят анамнезу клиническим исследованиям больного. Haряду с этим все шире начинает применяться постановка аллергических проб с бактериальными и небактериальными аллергенами. Выбор метода кожного тестирования зависит от типа повышенной чувствительности, вида аллергена, степени сенсибилизации, возраста.

Среди экзогенных неинфекционных аллергенов особое значение в практике стоматолога имеют медикаменты. Очень часто отмечается повышенная чувствительность к антибиотикам. Воздействие этих аллергенов вызывает, как правило, реакцию немедленного типа. Для диагностики лекарственной аллергии в некоторых клиниках применяют кожные пробы. Кожные пробы с лекарствами (особенно с антибиотиками) следует проводить осторожно, так как у больных с гиперсенсибилизацией может развиться тяжелая реакция - анафилактический шок. Начинать надо с малочувствительной капельной пробы. При получении отрицательной капельной пробы затем проводят скарификационную, аппликационную и внутрикожную. Если скарификационная кожная проба дает положительный результат, то дальнейшее исследование прекращают.

Методика капельных кожных проб. Кожу сгибательной поверхности предплечья протирают спиртом или смесью спирта с эфиром. Капли испытуемого лекарства и контрольного раствора наносят на расстоянии 5 см. При повышенной чувствительности через несколько минут на месте нанесения лекарства появляются зуд, отечность, гиперемия.

Методика скарификационных кожных проб. На обработанную спиртом кожу предплечья наносят капли медикамента и контрольной жидкости (растворитель, изотонический раствор хлорида натрия). Оспопрививательным скальпелем делают линейные надрезы (по 5 мм) в месте нанесения капель (не допускать появления крови). Выдерживают несколько минут и ватными тампонами удаляют остатки раствора, после чего учитывают немедленные (через 15-20 мин) и замедленные (через 24 ч) кожные реакции. Появление папулы (до 3 мм и более), а также гиперемии, везикулезных высыпаний, реакции со стороны регионарных лимфатических узлов расценивается как положительная реакция. На контрольном участке предплечья видна только полоска.

Методика аппликационных кожных проб. Сложенную в четыре слоя марлю (2 х 2 см) пропитывают раствором испытуемого вещества в концентрации, не вызывающей в норме раздражения кожи. На обезжиренную сухую кожу (обычно предплечья) накладывают эту марлю, а рядом при точно таких же условиях - марлю, пропитанную растворителем. Каждый участок накрывают сверху целлофаном и фиксируют пластырем. Результаты проб учитывают через 24-48 ч. Положительная реакция характеризуется появлением дерматита. Недостаток такой пробы - возможное отсутствие реакции кожи при повышенной чувствительности слизистой оболочки рта.

Методика внутрикожной пробы. Внутрикожные пробы в стоматологической практике применяются в основном для выявления сенсибилизации к бактериальным аллергенам. Наиболее часто при этом используются аллергены гемолитического стрептококка, гемолитического стафилококка, кишечной палочки, вульгарного протея, которые получают в готовом виде. Внутреннюю поверхность предплечья обрабатывают спиртом и эфиром. Короткой тонкой иглой внутрикожно вводят 0,1 мл аллергена, содержащего 4 кожные дозы. Кожно-аллергические реакции учитываются через 24-48 ч. При положительной реакции через 24 ч на месте введения аллергена возникают гиперемия и инфильтрат. Величина реакции расценивается следующим образом: резкоположительная реакция (+ + + +)-гиперемия, инфильтрат диаметром не менее 30 мм, болезненность при пальпации; положительная реакция (+ + +)-размер очага 21-29 мм и менее выраженная болезненность; слабоположительная реакция (+ +)-очаг размером 15-20 мм со слабым отеком; сомнительная реакция (+) -очаг размером 10-15 мм. При резко-положительной или положительной реакции на один аллерген у больного признается моноаллергия к данному аллергену, на два или более - полиаллергия. Повторное внутрикожное введение бактериальных аллергенов не рекомендуется проводить чаще 1 раза в месяц.

Безопасны методы диагностики аллергических состояний, проводимые вне организма (in vitro). Наиболее распространенными являются реакции лейкоцитолиза и лейкергии, базофильный тест, показатель повреждаемости нейтрофилов.

Реакция лейкоцитолиза основана на выявлении деформирующего действия бактериальных аллергенов на лейкоциты периферической крови. Специфический аллерген деформирует и разрушает 14% и больше нейтрофилов, неспецифическая деформация (контроль) не превышает 10%. Интенсивность кожных реакций и процент деформации нейтрофилов в реакции лейкоцитолиза находятся в прямой зависимости (60-80). Деформация более 35% нейтрофилов соответствует резкоположи-тельной реакции при кожной пробе, 25-34% - положительной реакции.

Выберите рубрику Аллергические заболевания Симптомы и проявления аллергии Диагностика аллергии Лечение аллергии Беременные и кормящие Дети и аллергия Гипоаллергенный быт Календарь аллергии

Физикальное обследование

Включает осмотр пациента, пальпацию, аускультацию (прослушивание звуков, сопровождающих работу органов) и перкуссию (прослушивание звуков при простукивании определённых участков на теле пациента).

Лабораторная диагностика аллергии

Лабораторный метод диагностики аллергии определяет состояние организма по взятым у пациента анализам. Большинство методов базируется на ИФА (иммуноферментный анализ) — специфической реакции антиген-антитело. На ИФА основаны метод множественной хемилюминисценции и иммунофлуоресцентный метод на аппарате ImmunoCAP.

Биохимический анализ крови

Изучает состояние внутренних органов и систем, наличие воспалительных процессов, определяя химический состав крови.

Скрининговое аллергологическое обследование

Объект исследования — сыворотка крови. Проводятся ИФА тесты на основные группы аллергенов. Метод позволяет сузить круг поиска виновного аллергена.

Определение специфических IgG

Объект — сыворотка крови. LgG-тест ИФА проводят с индивидуальными антигенами для точного выявления виновного аллергена.

Показания: диагностика пищевой аллергии и непереносимости.

Интерпретация результатов:

• 50 Ед/мл — результат отрицательный;

• 50 — 100 Ед/мл — слабое нарушение толерантности;
• 100 — 200 Ед/мл — умеренное нарушение толерантности;
• более 200 Ед/мл — выраженное нарушение толерантности.

Исследование специфических антител IgE

IgE антитела отвечают за реакции немедленного типа. Определяются в сыворотке крови методом ИФА. Выявляется вызывающий аллергию агент.

Показания: невозможность выявить аллерген через анамнез, отказ от кожных проб, системные реакции в анамнезе, дерматит, гипо- и гиперреактивность кожи, количественная оценка антител, lgE-зависимая пищевая аллергия.

Забор крови производится из локтевой вены. За несколько дней до сдачи крови исключают аллергенные продукты из диеты и контакт с животными, прекращают приём антигистаминных препаратов. Анализ проводится в период ремиссии, кровь берут натощак..

Нормальное (референсное) значение lgE в крови — менее 0,35 МЕ/мл

При выявлении lgE-зависимой аллергии показана аллерген-специфическая иммунотерапия

Исследование газового состава крови

Определяется pH, парциальное давление О2 и СО2, количество бикарбоната в крови пациента.

Исследование гормонального профиля

В крови измеряется уровень гормонов коры надпочечников.

Клинический анализ мочи

Оцениваются физико-химические характеристики мочи: цвет, прозрачность, плотность, кислотность, химический состав. В осадке определяют наличие эпителия, эритроцитов, лейкоцитов, бактерий.

Копрограмма

Используется при диагностике пищевой аллергии.

Общий анализ мокроты

Применяется при диагностике дыхательной аллергии. Исследуются количество,консистенция, цвет, запах, характер (слизь, гной, кровь, серозная жидкость), флора, форменные элементы.

Ревматологические пробы

Объект — кровь. Анализируется уровень ревматологического фактора, фибриногена, С-реактивного белка и антистрептолизина. Метод позволяет установить наличие, локализацию и источник воспаления соединительной ткани.

Вирусологические исследования

Объекты : кровь, кал, мокрота, спинномозговая жидкость. Определяется присутствие вирусов в организме.

Бактериологический анализ мокроты и других выделений (секретов) со слизистых и кожи

Производится посев образца в питательную среду и последующий анализ выращенных колоний. Позволяет выявить и количественно оценить наличие возбудителей инфекционных заболевании.

Цитологическое исследование секрета, мазков или смывов из полости носа, слизистой конъюнктив и др

Метод состоит в исследовании под микроскопом клеток, находящихся во взятом образце, для выявления их морфологических патологий и поражений и их причин.

Специфические методы аллергологического обследования

Данная группа методов диагностики аллергии проводится на пациенте и направлена на выявления агента, вызывающего аллергию.

Кожные пробы (скарификационные)

Производится оценка местной реакции на контакт аллергена с кожей.

Существуют следующие виды кожных проб:

Показания: данные анамнеза, указывающие на аллергическую природу заболевания.

Противопоказания:

• Острая фаза аллергии;
• Острые инфекционные заболевания;
• Аутоиммунные, онкологические, системные заболевания;
• Заболевания крови;
• Нервные и психические болезни;
• Возраст менее 3-х лет;
• Беременность, кормление грудью;
• Приём антигистаминных бронхоспазмолитических и гормональных препаратов.

Причины ложных результатов:

• Нарушение технологии проведения пробы;
• Неправильное хранение препаратов аллергенов;
• Пониженная реактивность кожи;
• Приём антигистаминных препаратов.

Положительный результат указывает на сенсибилизацию организма, при совпадении с результатами анамнеза делается вывод об аллергической природе заболевания, при несовпадении проводятся дополнительные тесты.

При положительной реакции на пробу Манту проводится дифференциальная диагностика поствакцинальной и инфекционной аллергии, то есть определяется, что вызвало местную реакцию — палочка Коха или антитела без инфекции.

Тест проводится врачом-аллергологом, с применением растворов аллергенов, помещаемых на кожу предплечья. Одновременно наносится до 15 проб.

Фрагмент сюжета телеканала МИР — проведение прик-тестирования детям

Элиминационные тесты

На несколько недель исключается контакт пациента с вероятными аллергенами, что приводит у улучшению общего состояния. При возобновлении воздействия искомого аллергена у больного снова проявляются симптомы аллергии.

Таким образом можно точно определить вещество, вызывающее аллергическую реакцию. Метод наиболее эффективен при пищевой, лекарственной аллергии и контактных дерматитах.

Провокационные тесты

Аллерген наносится на слизистую оболочку органа-мишени, возникает местная аллергическая реакция.

При диагностике аллергии используются следующие виды провокационных тестов:

• Назальный (показания: полиноз, ринит): аллерген помещают в ноздрю;
• Конъюнктивальный: аллерген закапывают под нижнее веко;
• Подъязычный (пищевая аллергия): аллерген закапывают под язык;
• Ингаляционный (показания: бронхиальная астма): вдыхается аэрозоль препарата аллергена;
  • Ингаляционный тест с карбахолином : подтверждение диагноза бронхиальной астмы;
  • Ингаляционный тест с холодным воздухом : исследование неспецифической гиперреактивности бронхов;
• Дополнительные методы аллергологического обследования:
  • Дункан-тест (на холодовую аллергию): помещают на кожу кусок льда на 20 минут;
  • Тепловой тест (на тепловую аллергию): помещают на кожу предплечья бюкс с горячей водой (40 о С) на 10 минут.

Функциональные методы диагностики аллергии

Позволяют оценить работу физиологических систем организма посредством инструментального измерения внешних проявлений их работы.

При диагностике аллергии оценивают работу лёгких и дыхательных путей:

• Пикфлуометрия — измерение пиковой скорости выдоха;
• Спирометрия и спирография — измеряются скоростные и объёмные характеристики дыхания;
• Пневмотахометрия — измерение скорости воздуха при форсированном вдохе и выдохе.

Инструментальные методы обследования

Арсенал инструментальных методов диагностики аллергии включает в себя:

• Переднюю риноскопию: диагностика поражений слизистой оболочке носа.
• Переднюю риноманометрию: измеряет сужение просветов носовых ходов вследствие назального аллерготеста.
• Эндоскопические исследования: осмотр внутренних органов посредством эндоскопа.

Кроме вышеперечисленных традиционных, существуют альтернативные методы диагностики аллергии.

Альтернативные методы диагностики аллергических заболеваний

Если аллергическое заболевание проявляется нехарактерными симптомами, или затруднена диагностика традиционными способами, прибегают к альтернативным методам диагностики аллергии.

Лейкоцитотоксический тест

Определяется количество лейкоцитов, несущих специфический антиген. Наличие антигена определяется по изменению внешнего вида лейкоцита при его реакции с подозреваемым аллергеном.

Aллергологический тест на выявление IgG в ИФА

Применяется при выявлении вызывающего аллергию агента и диагностике пищевой непереносимости.

VEGA-тестирование (электродермальное тестирование) метод Фоля (Voll)

Исследование электромагнитной проводимости в организме. Пониженная проводимость указывает на аллергический процесс.

Анализ волос и тестирование аллергии

Аурикулокардиальный рефлекс

Оценивается изменение пульса и кровенаполнения при контакте с аллергеном.

Для безошибочной постановки диагноза аллерголог при обследовании использует поочерёдно несколько из перечисленных методов диагностики аллергии.

Программа «Алло, доктор!». Современные методы молекулярной диагностики аллергии

В последние годы отмечается значительный рост аллергических заболеваний, особенно среди населения крупных индустриальных центров и мегаполисов, что диктует необходимость постоянного поиска новых диагностических приемов и методов лечения аллергии.

Диагноз ставится на основании физикальных, а также лабораторных, инструментальных и других методов общеклинического и аллергологического обследования.

Особое место среди методов специфического аллергологического обследования занимают так называемые провокационные тесты, направленные на выявление ответной реакции на специфический раздражитель — аллерген.

Условия проведения аллергологического тестирования

Провокационные тесты с использованием аллергенов может проводить исключительно специалист — аллерголог-иммунолог, владеющий практическими навыками проведения подобных исследований, способный быстро и грамотно провести лечебные мероприятия при возникновении системных реакций.

Возможность развития системных реакций при проведении такого тестирования делает данную процедуру опасной, поэтому ее следует осуществлять только в условиях специализированного кабинета или стационара, оборудованных всем, что необходимо для купирования системных реакций. Провокационные тесты имеют свои показания и противопоказания, которые нужно учитывать при назначении подобных методов диагностики.

Наиболее распространенные методы аллергологического тестирования

Для проведения специфического провокационного тестирования используются стандартизированные лечебно-диагностические аллергены, прошедшие регистрацию в России и допущенные к применению. Основные группы лечебно-диагностических аллергенов, применяемых на данный момент в России для диагностики немедленной аллергии, следующие: пыльцевые аллергены; аллергены домашней и библиотечной пыли; аллергены клещей домашней пыли; аллергены эпидермиса животных; аллергены из пера и пуха птиц; пищевые аллергены; инсектные аллергены; бактериальные и грибковые аллергены.

Основная цель провокационных тестов — выявить наличие гиперчувствительности к тому или иному аллергену, установить ее степень, а также подобрать спектр аллергенов для дальнейшего проведения аллерген-специфической иммунотерапии.

При проведении тестирования производится нанесение на кожу или слизистые конъюнктив либо дыхательного тракта одного или нескольких разведений аллергена, после чего оценивается выраженность реакции в ответ на этот раздражитель. Основные методы провокационного аллергологического тестирования: кожный (в том числе аппликационный); назальный; конъюнктивальный; ингаляционный; сублингвальный.

Кожное тестирование

Кожное тестирование — наиболее доступный и высокоспецифичный метод выявления гиперчувствительности как немедленного, так и замедленного типа.

Данный метод тестирования имеет противопоказания, которые также необходимо учитывать и при применении других провокационных тестов.

Противопоказания к проведению кожного тестирования: обострение основного заболевания; тяжелое, нескомпенсированное течение бронхиальной астмы; острые интеркуррентные инфекции (ОРЗ, ангина, пневмония и др.); декомпенсация заболеваний внутренних органов (печени, почек, сердечно-сосудистой системы, эндокринной системы, крови и др.); обострение очагов хронической инфекции. Активная фаза хронических инфекционных заболеваний (туберкулеза, сифилиса, бруцеллеза и др.); аутоиммунные заболевания (СКВ, склеродермия, ревматоидный артрит, дерматомиозит и др.); злокачественные новообразования; психические заболевания; беременность и лактация; синдром приобретенного иммунодефицита.

С целью диагностики одной из самых распространенных форм немедленной аллергии — атопии — применяют скарификационные и prick-методы кожного тестирования. Для диагностики гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) используют внутрикожные тесты с бактериальными и грибковыми аллергенами, для общей оценки ГЗТ возможно проведение кожных тестов с туберкулином и бруцеллином. Реакция оценивается через 24—48 ч. И в том и в другом случае используется тест-контрольная жидкость как отрицательный и раствор гистамина как положительный контроль.

Кожное тестирование с определенной долей вероятности может быть неинформативным (ложноположительные или ложноотрицательные результаты) по целому ряду причин — неправильное хранение аллергенов, снижение кожной реактивности, нарушения техники проведения кожного тестирования и др. Поэтому, как и другие виды провокационного тестирования, кожные тесты можно рассматривать в качестве уточняющего метода диагностики. При этом необходимо также учитывать, что по результатам кожного тестирования можно установить лишь наличие сенсибилизации (повышенной чувствительности организма к определенному аллергену). Для того чтобы поставить заключительный диагноз, необходимо установить четкую связь между наличием данной сенсибилизации и клиническими проявлениями заболевания, т. е. подтвердить, что именно этот аллерген ответственен за появление симптомов аллергии.

Для оценки степени чувствительности пациента к данному аллергену (а также с целью подбора начальной дозы лечебного аллергена для проведения аллерген-специфической иммунотерапии) проводится аллергометрическое титрование, т. е. тестирование с разными разведениями аллергена. Исследование осуществляют путем постановки кожных проб с различными разведениями аллергенов.

Кожные тесты можно проводить только с использованием специально разработанных диагностических аллергенов. Тесты с нанесением лекарственного препарата на кожу, внутрикожным или подкожным его введением с целью выявления лекарственной аллергии использовать не рекомендуется. Во-первых, это создает опасность возникновения системной реакции, а во-вторых, есть риск развития неспецифической местной воспалительной реакции, которая не может достоверно указывать на наличие или отсутствие аллергии.

Методика постановки кожных аллергологических проб

На кожу предплечья, предварительно обработанную спиртом, наносят каплю тест-контрольной жидкости, каплю 0,01% раствора гистамина, а также каплю аллергена (аллергенов). Раствор с гистамином является положительным контролем, а с тест-жидкостью — отрицательным. Расстояние между местами нанесения капель не менее 2,5-3 см. После этого производится повреждение эпидермиса в области каждой капли. При этом используют разные скарификаторы. Скарификацию также можно выполнять ланцетами — специальными скарификаторами с фиксированными на них аллергенами. При проведении prick-тестирования повреждение наносится посредством укола, при проведении скарификации — поверхностной царапины эпидермиса (при проведении этой процедуры важно не повредить кровеносные сосуды!). Реакции оценивают через 10-20 мин. Оценка скарификационных и prick-тестов по степени выраженности реакции приведена в и .

Аппликационные кожные тесты

Аппликационные кожные тесты (patch-tests) применяются для диагностики контактного аллергического дерматита и фотодерматита. Для проведения тестирования используются стандартизированные диагностикумы для выполнения аппликационных тестов: медикаменты местного действия, металлы, компоненты резины, клеящие вещества, антимикробные средства, ароматизаторы и другие вещества. Реакция оценивается через 48-72 ч.

Назальный тест

Назальный тест применяют для диагностики аллергического ринита. В один носовой ход закапывают 1 каплю тест-контрольной жидкости. При отсутствии какой-либо реакции в другой носовой ход последовательно закапывают по 1 капле десятикратного разведения аллергена (1:100, 1:10), затем цельный аллерген. Интервал между закапыванием аллергена с более высокой концентрацией должен составлять не менее 20-30 мин. Увеличение концентрации аллергена производится только при отсутствии реакции на предыдущее разведение. Тест считается положительным при появлении симптомов ринита. Проявления ринита также можно зафиксировать при передней риноскопии.

Конъюнктивальный тест

Конъюнктивальный тест используют для диагностики аллергического конъюнктивита. В нижний конъюнктивальный мешок глаза закапывают тест-контрольную жидкость. При отсутствии реакции в другой конъюнктивальный мешок последовательно закапывают по 1 капле аллергена в двукратных разведениях (1:2048, 1:1024, 1:512 и т. д., до 1:2). Интервал между нанесениями аллергена с разными концентрациями не менее 20-30 мин. Увеличение концентрации аллергена производится только при отсутствии реакции на предыдущую концентрацию. Тест считается положительным при появлении симптомов конъюнктивита.

Ингаляционный тест

Ингаляционный тест применяют для диагностики бронхиальной астмы и проводят только в условиях стационара. Сначала оценивают показатели функции внешнего дыхания — ОФВ 1 (первоначально не менее 70% от должных величин). Затем ингалируют контрольную жидкость. Ингаляции можно проводить с помощью дозирующего струйного ингалятора. При отсутствии реакции производятся ингаляции аллергена в двукратных разведениях (1:1024, 1:512, 1:256 и т. д., до 1:16). Через каждые 10 мин после очередной ингаляции регистрируется ОФВ 1 . При снижении показателя более чем на 20% тест считается положительным. После проведения теста пациент должен оставаться под наблюдением врача 24 ч. В течение одних суток возможно проведение ингаляционного теста только с одним аллергеном.

Сублингвальный тест

Сублингвальный тест применяют для диагностики лекарственной и пищевой аллергии. При наличии в анамнезе пациента тяжелых реакций, предположительно связанных с исследуемым препаратом или пищевым продуктом, предпочтительнее использовать лабораторные методы исследования. Перед началом тестирования измеряют ЧСС, АД, осматривают полость рта. Затем 1/8 (1/4) таблетки (или 2-3 капли растворенного лекарственного препарата) или натуральный пищевой продукт в разведении 1:10 помещают под язык пациента на 5-15 мин. Тест считается положительным при возникновении местной воспалительной реакции на слизистой оболочке полости рта или системной реакции. После тестирования больной должен находиться под наблюдением врача в течение суток. За этот период времени врач проводит мониторинг состояния сердечно-сосудистой и дыхательной систем пациента.

Реакции при проведении аллергологического тестирования

Возникновение местной аллергической реакции при проведении аллергологического тестирования является ожидаемой, однако, учитывая наличие провокации, подобный метод обследования сопряжен и с опасностью появления системных реакций, которые требуют принятия немедленных мер. Возникновение подобных осложнений при проведении тестирования возможно как в первые секунды (минуты), так и часы, а в некоторых случаях — и сутки.

Легкие признаки системной реакции: боли в суставах, головная боль, ощущение дискомфорта.

Умеренные признаки системной реакции: легкие проявления ринита, конъюнктивита или бронхиальной астмы (пиковая скорость выдоха не ниже 60% от должных величин или от показателя пациентов в период ремиссии). Симптомы хорошо контролируются соответствующими лекарственными препаратами (Н 1 -блокаторами или ингаляционными β 2 -агонистами).

Выраженные признаки системной реакции: крапивница, отек Квинке, нарушение бронхиальной проводимости (с показателем пиковой скорости выдоха ниже 60% от должной величины или от показателя пациента в период ремиссии), симптомы контролируются соответствующим лечением.

Угрожающие жизни состояния — анафилактический шок, отек жизненно важных органов (отек гортани) — требуют интенсивной терапии.

Основными причинами развития подобных реакций могут быть: несоблюдение требований, предъявляемых в отношении противопоказаний к провокационному тестированию; использование нестандартизированных аллергенов или препаратов, которые хранились без соблюдения соответствующих требований; нарушения технологии проведения тестирования; высокая индивидуальная чувствительность пациента.

Объем терапевтической помощи при возникновении системных реакций зависит от ее выраженности.

Во всех случаях возникновения системных реакций при проведении аллергологического тестирования необходима госпитализация для стационарного наблюдения и лечения пациента. Лечение тяжелых системных реакций необходимо проводить в условиях отделения реанимации и интенсивной терапии.

При возникновении системных реакций первое, что необходимо сделать,— прекратить введение (аппликацию, ингаляцию и т. д.) аллергенов. После этого следует начать проведение терапии, направленной на купирование реакции: введение системных антигистаминных препаратов (Н 1 -блокаторов), а также системных глюкокортикостероидов парентерально. В случае возникновения бронхообструктивного синдрома применяются β 2 -агонисты, холинолитики (ингаляционно), парентеральное введение метилксантинов, системных ГКС с учетом степени выраженности реакции.

Анафилактический шок — одно из самых серьезных проявлений аллергической реакции немедленного типа, сопровождающееся рядом системных нарушений и требующее оказания немедленной врачебной помощи. Время развития — от нескольких секунд до нескольких часов. Анафилактический шок может развиваться по разным сценариям. Клинические симптомы обусловлены сокращением гладких мышц, увеличением сосудистой проницаемости, дисфункцией эндокринных желез, нарушением свертываемости крови. Ведущими в клинической картине анафилактического шока являются кардиоваскулярные и респираторные нарушения, одно из которых может превалировать над другим.

В более легких случаях анафилактический шок начинается с появления предвестников — чувства тревоги, страха, слабости, ощущения жара. Могут появляться кожный зуд, высыпания по типу крапивницы, эритема, отек Квинке, осиплость голоса (вплоть до афонии), затруднение глотания, головокружение, головная боль, шум в ушах, онемение и покалывание пальцев, языка и губ, симптомы ринита и конъюнктивита, боли в животе, пояснице и в области сердца. При осмотре — бледность кожных покровов, иногда с синюшным оттенком. Наблюдаются одышка, стридорозное дыхание, хрипы; рвота, непроизвольная дефекация и мочеиспускание. Снижение АД на 30-50 мм рт. ст., тоны сердца глухие, пульс нитевидный. Тахикардия, тахиаритмия. Потеря сознания отмечается не сразу или вовсе не происходит.

При анафилактическом шоке средней степени тяжести указанные выше симптомы носят более выраженный характер. Потеря сознания происходит быстро, нередко отмечаются тонические и клонические судороги, холодный липкий пот, цианоз губ, расширение зрачков. Тоны сердца глухие, сердечный ритм неправильный, нитевидный, АД не определяется.

При тяжелом течении — развитие стремительное. Потеря сознания немедленная. Тоны сердца не выслушиваются, АД не определяется. Дыхание не выслушивается из-за полной обструкции дыхательных путей.

Лечебные мероприятия при возникновении анафилактического шока

Лечебные мероприятия при возникновении анафилактического шока должны проводиться незамедлительно. Ввести подкожно 0,3-0,5 мл 0,1% раствор адреналина. Место нанесения аллергена (по возможности) обколоть 0,1% раствором адреналина или норадреналина в дозе 0,1-0,3 мл с 4-5 мл физиологического раствора. Можно приложить лед. Необходимо начать внутривенное капельное введение: 300 мл 5% раствора глюкозы + 1 мл 0,1% раствора норадреналина. Альтернативно: введение допамина (от 300-700 мкг/мл, но не более 1500 мкг/мл) с постепенным снижением. При необходимости можно продолжать введение прессорных аминов (0,1% раствор адреналина подкожно) с интервалами 5-10 мин. Длительность введения определяется гемодинамическими показателями. Внутривенное капельное введение системных ГКС-препаратов: гидрокортизона 250 мг, или преднизолона 90-120 мг, или дексаметазона 8-32 мг. При возникновении бронхообструктивного синдрома ввести эуфиллин 10,0 мл 2,4% раствора в/в на физиологическом растворе. При отеке легких дозу ГКС можно увеличить, а также ввести в/в 0,5 мл 0,5% строфантина с 10 мл 40% глюкозы. При необходимости проводится: интубация или трахеостомия и перевод на ИВЛ, оксигенация — ингаляция увлажненного кислорода с помощью носового катетера (скорость — 5-10 л/мин). Применение диуретиков показано только при нормализации АД. При систолическом АД выше 90 мм рт. ст. могут быть введены антигистаминные препараты: тавегил — 2,0 мл. Осуществляется введение плазмозамещающих препаратов, жидкости в/в капельно или струйно. Возможно введение декстранов. Введение ГКС и антигистаминных препаратов продолжить до улучшения состояния пациента. Отмена вышеуказанных препаратов производится постепенно и сообразно объективным признакам стабилизации. Необходим постоянный мониторинг функции дыхательной и сердечно-сосудистой систем. Возможно развитие осложнений (инфаркт миокарда, отек легких, отек мозга и проч.).

Длительность лечения варьирует от нескольких часов до нескольких суток.

Таким образом, провокационное тестирование с использованием диагностических аллергенов продолжает оставаться важной, а в ряде случаев незаменимой частью специфического аллергологического обследования. Провокационные методы позволяют оценить аллергологический статус пациента, проводить подбор и оценку эффективности терапии, осуществлять динамическое наблюдение за состоянием пациента.

В последнее время во всем мире проводится работа, направленная на создание новых диагностических препаратов на основе аллергенов. Однако основной принцип подобной диагностики остается неизменным: назначение, проведение и оценка результатов провокационного аллергологического тестирования должны производиться исключительно специалистом — аллергологом-иммунологом.

Е. Н. Медуницына, кандидат медицинских наук НИИ аллергологии и иммунологии, Москва