Улучшения качества диагностики ВИЧ-инфекции

1. Больные по клиническим показаниям:

Лихорадящие более 1 месяца;

Имеющие увеличение лимфоузлов двух и более групп свыше 1 месяца;

С диареей, длящейся более 1 месяца;

С необъяснимой потерей массы тела на 10 и более процентов;

С затяжными и рецидивирующими пневмониями или пневмониями, не поддающимися обычной терапии;

С подострым энцефалитом и слабоумием у ранее здоровых лиц;

С ворсистой лейкоплакией языка;

С рецидивирующей пиодермией;

Женщины с хроническими воспалительными заболеваниями женской репродуктивной системы неясной этиологии;

2. Больные с подозрением или подтвержденным диагнозом:

Наркомания (с парентеральным путем введения наркотиков);

Заболевания, передающиеся половым путем;

Саркомы Капоши;

Лимфомы мозга;

Т-клеточного лейкоза;

Легочного и внелегочного туберкулеза;

Гепатита В, Hds-антигеноносительства (при постановке диагноза и через 6 месяцев);

Заболевания, обусловленного цитомегаловирусом;

Генерализованной или хронической формы инфекции, обусловленной вирусом простого герпеса;

Рецедивирующего опоясывающего лишая у лиц моложе 60 лет;

Мононуклеоза (через 3 месяца после начала заболевания);

Пневмоцистоза (пневмонии);

Токсоплазмоза (центральной нервной системы);

Криптококоза (внелегочного);

Криптоспородиоза;

Изоспороза;

Гистоплазмоза;

Стронгилоидоза;

Кандидоза пищевода, бронхов, трахеи или легких;

Глубоких микозов;

Атипичных микобактериозов;

Прогрессирующей многоочаговой лейкоэнцефалопатии;

Анемии различного генеза.

3. Беременные - в случае забора абортной и плацентарной крови для дальнейшего использования в качестве сырья для производства иммунобиологических препаратов.

Примечание: В соответствии с Федеральным Законом "О предупреждении распространения в Российской Федерации заболевания, вызываемого вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ-инфекции)" принудительное обследование на ВИЧ запрещается.

Перечень лиц, подлежащих обязательному медицинскому освидетельствованию на выявление заражения вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ-инфекции) (утвержден постановлением Кабинета Министров РТ от 14 июня 1999 г. N 365)

1. Освидетельствование на выявление заражения вирусом иммунодефицита человека (заболевание СПИД) проводится лечебно-профилактическими учреждениями государственной и коммунальной форм собственности, имеющих специальную лицензию, предоставленную в порядке, установленном законодательством Республики Татарстан.

2. Освидетельствованию подлежат:

2.1. Лица, относящиеся к группе повышенного риска:

допускающие немедицинское употребление наркотических, сильнодействующих и психотропных веществ, задержанных в состоянии наркотического опьянения;

ведущие беспорядочный половой образ жизни;

без определенного места жительства;

входящие в контакт с ВИЧ-инфицированными по эпидемиологическим показаниям.

2.2. Лица, страдающие наркоманией, токсикоманией, - при постановке на учет и в дальнейшем один раз в 6 месяцев до снятия с учета.

2.3. Лица, проходящие судебно-медицинскую экспертизу по поводу половых преступлений.

2.4. Лица, поступающие:

в приемники-распределители;

в следственные изоляторы.

2.5. Лица, задержанные за совершение правонарушений, связанных:

с незаконным оборотом наркотиков;

с вовлечением в занятие проституцией;

с занятием проституцией;

с организацией и содержанием притонов.

2.6. Лица, занимающиеся бродяжничеством, - при обращении за медицинской помощью либо по направлению органов внутренних дел.

Приказ Минздрава России от 28.12.93 N 302 "Об утверждении

Похожая информация:

1. I. Перечень вопросов для проведения проверки знаний кандидата на получение свидетельства частного пилота с внесением квалификационной о виде воздушного судна - самолет

размер шрифта

ПРИКАЗ Минздравмедпрома РФ от 30-10-95 295 О ВВЕДЕНИИ В ДЕЙСТВИЕ ПРАВИЛ ПРОВЕДЕНИЯ ОБЯЗАТЕЛЬНОГО МЕДИЦИНСКОГО... Актуально в 2018 году

Приложение 3. ПЕРЕЧЕНЬ ПОКАЗАНИЙ ДЛЯ ОБСЛЕДОВАНИЯ НА ВИЧ / СПИД В ЦЕЛЯХ УЛУЧШЕНИЯ КАЧЕСТВА ДИАГНОСТИКИ ВИЧ-ИНФЕКЦИИ

1. Больные по клиническим показаниям:

Лихорадящие более 1 месяца;

Имеющие увеличение лимфоузлов двух и более групп свыше 1 месяца;

С диареей, длящейся более 1 месяца;

С необъяснимой потерей массы тела на 10 и более процентов;

С затяжными и рецидивирующими пневмониями или пневмониями, не поддающимися обычной терапии;

С подострым энцефалитом и слабоумием у ранее здоровых лиц;

С ворсистой лейкоплакией языка;

С рецидивирующей пиодермией;

Женщины с хроническими воспалительными заболеваниями женской репродуктивной системы неясной этиологии.

2. Больные с подозрением или подтвержденным диагнозом:

Наркомании (с парентеральным путем введения наркотиков);

Заболеваний, передающихся половым путем;

Саркомы Капоши;

Лимфомы мозга;

Т-клеточного лейкоза;

Легочного и внелегочного туберкулеза;

Гепатита В, Hbs-антигеноносительства (при постановке диагноза и через 6 месяцев);

Заболевания, обусловленного цитомегаловирусом;

Генерализованной или хронической формы инфекции, обусловленной вирусом простого герпеса;

Рецидивирующего опоясывающего лишая у лиц моложе 60 лет;

Мононуклеоза (через 3 месяца после начала заболевания);

Пневмоцистоза (пневмонии);

Токсоплазмоза (центральной нервной системы);

Криптококоза (внелегочного);

Криптоспородиоза;

Изоспороза;

Гистоплазмоза;

Стронгилоидоза;

Кандидоза пищевода, бронхов, трахеи или легких;

Глубоких микозов;

Атипичных микобактериозов;

Прогрессирующей многоочаговой лейкоэнцефалопатии;

Анемии различного генеза.

3. Беременные - в случае забора абортной и плацентарной крови для дальнейшего использования в качестве сырья для производства иммунобиологических препаратов.

Примечание. В соответствии с Федеральным законом "О предупреждении распространения в Российской Федерации заболевания, вызываемого вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ-инфекции)" принудительное обследование на ВИЧ запрещается.

Заместитель начальника
Управления профилактики,
контроля за болезнями и
медицинской статистики
Ю.М.ФЕДОРОВ

… диагностика любого инфекционного заболевания основана на сопоставлении эпидемиологических, клинических и лабораторных данных, и преувеличение значения одной из групп этих данных может привести к диагностическим ошибкам.

Диагностика ВИЧ-инфекции включает в себя два этапа :
I этап - установление собственно факта зараженности ВИЧ-инфекцией ;
II этап - определение стадии заболевания .

УСТАНОВЛЕНИЕ ФАКТА ЗАРАЖЕННОСТИ ВИЧ-ИНФЕКЦИЕЙ

Установление собственно факта зараженности ВИЧ-инфекцией (то есть выявление ВИЧ-инфицированных) в свою очередь также включает в себя два этапа :
I этап - иммуноферментный анализ (ИФА) : метод ИФА является скрининговым (отборочным) - отбор предположительно инфицированных лиц, то есть его целью является выявление подозрительных лиц и отсеивние здоровых лиц; антитела к ВИЧ выявляют с помощью других антител к искомым антителам (антитела против других антител). Эти «вспомогательные» антитела метят ферментом. Все скрининговые тесты обязаны быть высокочувствительными, чтобы не пропустить больного. Из-за этого их специфичность не очень высокая, то есть ИФА может дать положительный ответ («вероятно болен») у неинфицированных людей (например, у больных аутоиммунными заболеваниями: ревматизм, системная красная волчанка и др.). Частота ложноположительных результатов при использовании различных тест-систем колеблется от 0,02 до 0,5%. Если у человека ИФА дало положительный результат, то для подтверждения факта инфицирования ВИЧ необходимо обследоваться дальше. При проведении ИФА в 3 - 5% случаев возможны ложноотрицательные результаты - если инфицирование произошло относительно недавно и уровень антител еще очень низкий, или в терминальной стадии болезни, характеризующейся тяжелым поражением иммунной системы с глубоким нарушением процесса антителообразования. Поэтому при наличии данных, свидетельствующих о контакте с инфицированными ВИЧ обычно проводят повторные исследования через 2 - 3 месяца.
II этап - иммуноблоттинг (в модификации Western Blot, вестерн-блот) : является более сложным методом и служит для подтверждения факта инфицирования. Этот метод выявляет не комплексные антитела к ВИЧ, а антитела к отдельным его структурным белкам (p24, gp120, gp41 и др.). Результаты иммуноблоттинга считаются положительными, если выявляются антитела хотя бы к трем белкам, один из которых кодируется генами env , другой - генами gag , третий - генами pol . Если обнаруживаются антитела к одному или двум белкам, результат считается сомнительным и требует подтверждения. В большинстве лабораторий диагноз ВИЧ-инфекции ставится, если одновременно выявляются антитела к белкам р24 , р31 , gp4l и gpl20/gp160. Суть метода: вирус разрушают на компоненты (антигены), которые состоят из ионизированных аминокислотных остатков, а потому все компоненты имеют отличающийся друг от друга заря; затем с помощью электрофореза (электрического тока) антигены распределяются на поверхности полоски - если в исследуемой сыворотке есть антитела к ВИЧ, то они будут взаимодействовать со всеми группами антигенов, а это можно выявить.

Следует помнить , что антитела к ВИЧ появляются у 90-95% инфицированных в течение 3-х месяцев после заражения, у 5-9% инфицированных антитела к ВИЧ появляются через 6 месяцев и у 0,5-1 % инфицированных антитела к ВИЧ появляются в более поздние сроки. В стадии СПИДа количество антител может снижаться, вплоть до полного исчезновения.

В иммунологии существует такое понятие, как «серологическое окно» - период от инфицирования до появления такого количества антител, которое можно выявить. Для ВИЧ этот период обычно продолжается от 2 до 12 недель, в редких случаях дольше. В период «серологического окна» по анализам человек здоров, но на самом деле является зараженным ВИЧ. Установлено, что ДНК ВИЧ может находиться в геноме человека не менее трех лет без признаков активности и антитела к ВИЧ (маркеры ВИЧ-инфицирования) не появляются.

В данный период («серологическое окно») выявить ВИЧ-инфицированного и даже через 1-2 недели после заражения возможно с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР). Это чрезвычайно чувствительный метод - теоретически можно выявить 1 ДНК на 10 мл среды. Суть метода заключается в следующем: с помощью полимеразной цепной реакции получают много копий нуклеиновой кислоты (вирус является нуклеиновой кислотой -ДНК или РНК - в белковой оболочке), которые потом выявляют с помощью меченых ферментов или изотопов, а также по характерному строению. ПЦР является дорогостоящим методом диагностики, поэтому при скрининге и в плановом порядке не используется.

ОПРЕДЕЛЕНИЕ СТАДИИ ЗАБОЛЕВАНИЯ

В основе развития СПИДа лежит , в первую очередь, разрушение Т-лимфоцитов-хелперов, маркируемых моноклональными антителами - кластерами дифференцировки – как CD4. В связи с этим проведение диагностики и наблюдение за прогрессированием заболевания невозможно без контроля субпопуляции Т-хелперов, который наиболее удобно осуществлять с помощью лазерного клеточного сортировщика.

При слабо выраженной ВИЧ-инфекции количество Т-лимфоцитов - чрезвычайно вариабельный показатель. В целом, снижение числа клеток CD4 (абсолютное и относительное) обнаруживается у лиц, ВИЧ-инфицирование которых произошло не менее года назад. С другой стороны, на ранних стадиях инфекции нередко оказывается резко повышенным число Т-супрессоры (CD8) как в периферической крови, так и в увеличенных лимфоузлах.

При выраженном СПИДе абсолютное большинство больных имеет сниженное общее число Т-лимфоцитов (менее 1000 в 1 мкл крови, в том числе лимфоцитов CD4 - менее чем 22 в 1 мкл, тогда как абсолютное значение содержания CD8 остаётся в пределах нормы). Соответственно, резко снижается соотношение CD4/ CD8. Ответ Т-лимфоцитов in vitro на стандартные антигены и митогены снижается в строгом соответствии с относительно сниженным числом CD4.

Для поздних стадии СПИДа характерны общая лимфопения, нейтропения, тромбоцитопения (соответственно, снижение числа лимфоцитов, нейтрофилов и тромбоцитов), анемия. Эти изменения могут быть следствием центрального угнетения кроветворения за счёт поражения кроветворных органов вирусом, а также - аутоиммунного разрушения клеточных субпопуляции на периферии. Кроме того, для СПИДа характерно умеренное увеличение количества гамма-глобулинов с доминирующим увеличением содержания IgG. Больные с выраженными симптомами СПИДа нередко имеют повышенный уровень IgA. На некоторых стадиях заболевания существенно повышается уровень таких маркёров СПИДа, как 1-микроглобулин, кислотостабильный -интерферон, 1-тимозин. То же происходит с секрецией свободного неоптерина - метаболита макрофагов. Пока не представляется возможным оценить относительную значимость каждого из перечисленных тестов, число которых постоянно возрастает. Поэтому их следует рассматривать во взаимодействии с маркёрами ВИЧ-инфекции как иммуновирусологического, так и цитологического характера. Для клинического анализа крови характерны лейкопения, лимфопения (соответственно, снижение числа лейкоцитов и лимфоцитов).

1 стадия - «стадия инкубации » - антитела к ВИЧ еще не выявляются; диагноз ВИЧ-инфекции на данной стадии ставится на основании эпидемиологических данных и лабораторно должен подтверждаться обнаружением в сыворотке крови пациента вируса иммунодефицита человека, его антигенов, нуклеиновых кислот ВИЧ;
2 стадия - «стадия первичных проявлений » - в данном периоде уже имеется выработка антител:;
2А стадия - «бессимптомная » - ВИЧ-инфекция проявляется только выработкой антител;
2Б стадия - «острая ВИЧ-инфекция без вторичных заболеваний » - в крови больных могут обнаруживаться широкоплазменные лимфоциты - «мононуклеары» и часто отмечается транзиторное снижение уровня СD4-лимфоцитов (острая клиническая инфекция отмечается у 50-90% инфицированных лиц в первые 3 месяца после заражения; начало периода острой инфекции, как правило, опережает сероконверсию, т.е. появление антител к ВИЧ);
2В стадия - «острая ВИЧ-инфекция с вторичными заболеваниями » - на фоне снижения уровня СD4-лимфоцитов и развившегося вследствие этого иммунодефицита появляются вторичные заболевания различной этиологии (ангина, бактериальная и пневмоцистная пневмония, кандидозы, герпетическия инфекция и др.);
3 стадия - «латентная » - в ответ на прогрессирование иммунодефицита происходит модификация иммунного ответа в виде избыточного воспроизводства СD4-клеток с последующим постепенным снижением уровня СD4-лимфоцитов, в среднем со скоростью 0,05-0,07x109/л в год; в крови обнаруживаются антитела к ВИЧ;
4 стадия - «стадия вторичных заболеваний » - истощение лимфоцитов популяции CD4, концентрация антител к вирусу значительно снижается (в зависимости от тяжести вторичных заболеваний выделяют стадии 4А, 4Б, 4В);
5 стадия - «терминальная стадия » - типично снижение количества СD4-клеток ниже 0,05x109/л; концентрация антител к вирусу значительно снижается или антитела могут не определяться.

ПЕРЕЧЕНЬ КАТЕГОРИЙ БОЛЬНЫХ, ПОДЛЕЖАЩИХ ОБСЛЕДОВАНИЮ НА НАЛИЧИЕ АНТИТЕЛ К ВИЧ ПО КЛИНИЧЕСКИМ ПОКАЗАНИЯМ

1. Лица, у которых отмечается:

Лихорадка более 1 месяца;

Увеличение лимфатических узлов 2-х и более групп продолжительностью 1 месяц и более;

Диарея, которая продолжается более 1 месяца;

Немотивированная потеря массы тела 10% и более;

2. Лица с подозрением или подтвержденным диагнозом:

Бактериальные инфекции у детей младше 13 лет, множественные и рецидивирующие;

Прогрессирующей многофокусной лейкоэнцефалопатией;

Сальмонеллезной (кроме Salmonella typhy) септицемией, рецидивирующей;

Рецидивирующий опоясывающий у лиц старше 60 лет;

Лабораторная диагностика:

В связи с исключительно высокой медико-социальной значимостью ВИЧ-инфекции особое значение приобретает своевременная и точная лабораторная диагностика этого заболевания, особенно на ранних стадиях инфицирования, при отсутствии или минимальном проявлении клинических признаков заражения. В общем перечне лабораторных исследований, обеспечивающих идентификацию ВИЧ-инфекции (определение циркулирующих в крови антител, антигенов и иммунных комплексов; культивирование вируса, выявление его геномного материала и ферментов; оценка функций клеточного звена иммунной системы и др.), основная роль принадлежит, несомненно, методам серологической диагностики, направленным на определение антител, а также антигенов возбудителя в крови и других биологических жидкостях организма. Особенно велико значение серодиагностики для лабораторного практического звена службы по профилактике и борьбе со СПИДом в связи с чем выделение вируса и идентификация его геномного и (или) ферментного материала требует особых условий, которыми располагают лишь немногие централизованные лаборатории при НИИ.

Материалы для исследования:

Серодиагностика подавляющего большинства вирусных инфекций осуществляется, как известно, посредством регистрации нарастания титра антител к возбудителю в крови, респираторных секретах и других биологических жидкостях, собранных в начале и в конце заболевания.

Отличительной особенностью как скрининговых, так и верификационных серологических исследований при ВИЧ-инфекции является индикация антител в единичной пробе, в основном крови или плазмы, с формированием ответа по принципу "да-нет". Это связано с продолжительностью инфекционного процесса, исчисляемой годами, с невозможностью, как правило, определить его начало и с особенностями формирования иммунного ответа на стадиях заболевания.

Хотя традиционным материалом для определения ВИЧ-антител и антигенов продолжают оставаться сыворотка и(или) плазма крови, спектр биологических материалов для таких исследований в настоящее время значительно расширился. В число биологических материалов для определения ВИЧ-антител и антигенов входят следующие материалы:

Сыворотка (плазма) крови. При необходимости массового скрининга образцов крови рекомендуется тестировать сывороточные смеси (пулы), составленные с таким расчетом, чтобы конечное разведение каждого образца не превышало 1:100. При получении положительного результата повторно исследуют каждую сыворотку положительной смеси. Способ не ведет к потере чувствительности как в ИФА, так и в Иммуноблотте, снижая трудозатраты и стоимость первичного обследования на 60-80%. Для сбора образцов крови пригодны ватные тампоны, сохраняемые при -20°С. Антитела в элюатах из тампонов обнаруживают после 4 месяца их хранения.

Актуальную проблему представляет обследование образцов трупной крови с целью посмертной диагностики ВИЧ-инфекции, подтверждения прижизненного диагноза, скрининга доноров трупной роговицы, решения ряда спорных эпидемиологических и юридических вопросов.

Приобретает широкое распространение метод сбора капиллярной крови из пальцев на диски из специальной фильтровальной бумаги с последующим их высушиванием - метод "сухой капли". Упакованные герметично в полиэтиленовые пакеты с влагопоглотителем, такие образцы могут храниться более 6 месяцев при комнатной температуре и подлежат транспортировке на дальние расстояния в обычных условиях. Ig G в сухой капле стабильны. В дальнейшем растворяются растворами и исследуются в ИФА. В сухой капле возможен поиск не только антител но и антигенов ВИЧ. Следовательно метод пригоден для ранней диагностики ВИЧ-инфекции и слежения за течением заболевания.